Protease chịu nhiệt được ứng dụng rộng rãi trong các quy trình công nghiệp do thể hiện hoạt tính xúc tác tối ưu ở nhiệt độ cao. Ngày càng có nhiều nghiên cứu về protease có nguồn gốc từ xạ khuẩn bởi các đặc tính nổi bật của chúng như chịu nhiệt, hoạt động được trong các điều kiện có pH cực đoan và sự hiện diện của các chất ức chế. Trong nghiên cứu này, dịch protease ngoại bào từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. CNXK100 đã được chứng minh có hoạt tính xúc tác cao nhất ở 75℃. Khi nuôi cấy Streptomyces sp. CNXK100 trong môi trường Gause I cải tiến có bổ sung 1,0% skim milk, 1,0% lactose, 0,1% NaNO3 trong điều kiện lắc 150 vòng/phút ở 30-35℃, pH ban đầu 7,0-8,0, dịch protease ngoại bào thể hiện hoạt tính cao nhất (2943,21±12,1 U/ml). Các điều kiện nuôi cấy đã được xác định sẽ là tiền đề để ứng dụng protease chịu nhiệt được sinh tổng hợp từ Streptomyces sp. CNXK100 trong các lĩnh vực có liên quan.Thermostable proteases are widely used in various industrial applications because of their high catalytic activity at high temperatures. In recent years, more and more studies on actinomycetes-derived thermostable proteases have been done to explore their remarkable biological characterstics such as thermostability, ability to catalyze in extreme pH, and in presence of inhibitors. In this study, extracellular protease from Streptomyces sp. CNXK100 was proved to display highest activity at 75℃. Cell-free culture of Streptomyces sp. CNXK100 shown the highest of proteolytic activity (2943.21±12.1 U/ml) when this strain was cultured in modified Gause I medium supplemented with 1.0% skim milk, 1.0% lactose, and 0.1% NaNO3 under shaking conditions at 150 rpm at 30-35℃, initial medium pH 7.0-8.0. With definded culture conditions, thermostable protease from Streptomyces sp. CNXK100 will be subsequently used for many potential applications in industries.