Cordyceps militaris is an insect parasitic fungus with high medicinal value similar to Cordyceps sinensis and has great economic value. Ensuring the balance between the biomass and the bioactive potential of C. militaris plays an important role in the development of quality products from this medicinal fungus. In this study, nitrogen sources (fresh silkworm pupae, peptone, yeast extract) with different concentrations were used to evaluate the effect on yield, morphology and content of cordycepin, adenosine of C. militaris. The results showed that the N1 medium using 20 g\L fresh silkworm pupae, 0.5g\L KH2PO4 and 0.5g\L MgSO4 gave the highest yield and active ingredient content, with cordycepin yield of 17.01 mg\jar. Adding carbon sources (glucose and sucrose) at concentrations (10, 20, 40 g\L) to N1 medium can shorten the time of filamentous spreading and the time of fruit body formation, but significantly reduce cordycepin content. This result has important implications for medium optimization for C. militaris culturing.Cordyceps militaris, loài nấm kí sinh trên côn trùng, có giá trị dược liệu cao tương tự như nấm Cordyceps sinensis và có giá trị kinh tế rất lớn. Việc đảm bảo sự hài hoà giữa phát triển sinh khối và khả năng tích lũy hoạt chất trong quả thể nấm có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các sản phẩm chất lượng từ loại nấm dược liệu này. Trong nghiên cứu này, hiệu quả sử dụng các nguồn nitơ (nhộng tằm tươi, pepton, cao nấm men) và bổ sung carbon trong môi trường nuôi cấy nhân tạo nấm Đông trùng hạ thảo C. militaris đến phát triển sinh khối và hàm lượng cordycepin, adenosin trong quả thể nấm đã được đánh giá. Kết quả cho thấy, môi trường N1 sử dụng 20 g\L nhộng tằm tươi, 0,5 g\L KH2PO4 và 0,5 g\L MgSO4 cho năng suất và hàm lượng hoạt chất cao nhất, đạt 17,01 mg cordycepin\bình nuôi cấy. Bổ sung thêm các nguồn carbon (glucose và sucrose) với hàm lượng (10, 20, 40 g\L) vào môi trường N1 có thể rút ngắn thời gian lan sợi và thời gian hình thành quả thể nấm, nhưng làm giảm rõ rệt hàm lượng cordycepin. Kết quả nghiên cứu có vai trò quan trọng trong việc định hướng lựa chọn thành phần tối ưu của môi trường nuôi cấy C. militaris để có nấm thành phẩm đáp ứng yêu cầu về chất lượng cảm quan và hàm lượng hoạt chất cordycepin cao