From 191 barramundi (Lates calcarifer) suspected with Vibriosis, we identified Vibrio spp. in 149 samples. The results of species determination showed that among 175 isolates, the Vibrio harveyi accounted for the highest prevalence (45.71% - 80/175), followed by V.vulnificus (29.71% - 52/175), V. parahaemolyticus(12.57% - 22/175), V. alginolyticus (4.57% - 8/175), and 13/175 (7.43%) was not specified. The similarity level of 16S rRNA gene sequences of two V. harveyi strains isolated in Khanh Hoa were 99.2% - 99.93% in comparison with those of V. harveyi strain on GenBank and the reference strain ATCC 33843. The results of identifying Vibrio species on barramundi raising in Khanh Hoa province are premise for further studies on selecting representative strains to develop vaccines against Vibriosis on barramundi.Từ 191 mẫu cá chẽm nghi mắc bệnh do vi khuẩn Vibrio, đã phân lập được vi khuẩn Vibrio spp. trong149 mẫu (78,01%). Trong 149 mẫu trên, phân lập được 175 chủng vi khuẩn Vibrio. Khi xác đinh loài trongtổng số 175 chủng vi khuẩn Vibrio spp. cho thấy loài V. harveyi chiếm tỷ lệ cao nhất (45,71% - 80/175),tiếp theo là V.vulnificus (29,71% - 52/175), V. parahaemolyticus (12,57% - 22/175), V. alginolyticus(4,57% - 8/175) và có 13/175 chủng (7,43%) chưa xác định được loài. Kết quả so sánh trình tự gen 16S rRNA của 2 chủng V. harveyi phân lập tại Khánh Hòa cho thấy hai chủng này tương đồng 99,2% - 99,93%với các chủng V. harveyi trên Ngân hàng Gen và chủng tham chiếu ATCC 33843. Kết quả xác định tỷ lệnhiễm các chủng Vibrio trên cá chẽm nuôi tại Khánh Hòa là tiền đề cho những nghiên cứu tiếp theo về lựachọn các chủng điển hình để phát triển vacxin phòng bệnh do Vibrio trên cá chẽm.