Nghiên cứu được thực hiện nhằm phân lập và tuyển chọn một số chủng vi khuẩn Bacillus có hoạt tính kháng nấm Colletotrichum spp. gây bệnh thán thư trên trái đu đủ sau thu hoạch. Kết quả nghiên cứu đã phân lập được 12 chủng vi khuẩn Bacillus từ mẫu đất vùng rễ cây đu đủ trồng ở tỉnh Vĩnh Long. Nghiên cứu sử dụng phương pháp giếng khuếch tán trên thạch và phương pháp cấy kép để xác định hoạt tính đối kháng của các chủng vi khuẩn Bacillus phân lập lên nấm Colletotrichum spp. Kết quả khảo sát cho thấy, có 6/12 chủng Bacillus thể hiện hoạt tính đối kháng với nấm Colletotrichum spp. Hai chủng vi khuẩn BHL21 và BHL23 thể hiện hoạt tính đối kháng cao nhất đối với nấm Colletotrichum spp. với đường kính vòng vô nấm lần lượt là 20,6 mm và 18,6 mm. Dựa trên kết quả quan sát các đặc điểm hình thái, sinh hóa và kết quả PCR và giải trình tự đoạn gen 16S rRNA, chủng BHL21 tương đồng 100% với vi khuẩn B. methylotrophicus và chủng BHL23 tương đồng 99,87% với chủng B. amyloliquefaciens trên ngân hàng Genbank.The study was conducted to isolate and select Bacillus strains with antifungal activity against Colletotrichum spp. causing anthracnose disease on papaya fruit after harvest. As a result, 12 strains of Bacillus were isolated from rhizopheric soil samples of papaya roots grown in Vinh Long province. The study used diffusion well method on agar and double culture method to determine antagonistic activity of isolated Bacillus strains on Colletotrichum spp. The results showed that 6/12 Bacillus strains showed antagonistic activity against Colletotrichum spp. Two bacterial strains BHL21 and BHL23 exhibited the highest antagonistic activity against Colletotrichum spp. with inhibition zone diameters of 20.6 mm and 18.6 mm, respectively. Based on morphological, biochemical characteristics and PCR and sequencing results of 16S rRNA gene, strain BHL21 is 100% homologous to B. methylotrophicus and strain BHL23 is 99.87% homologous to B. amyloliquefaciens on Genbank.