Opuntia ficus-indica known as both a nutritious food source for both humans and livestock, and an ideal solution for regions affected by desertification and salinity in sandy soils along coastal areas, that were unsuitable for cultivation in Viet Nam, especially in Ninh Thuan province. In recent years, O. ficus-indica stem rot disease has emerged and rapidly spread, leading to the collapse of plants and causing many difficulties for farmers. Based on morphological characteristics and DNA sequence analysis of the internal transcribed spacer (ITS) region, the pathogenic fungi were identified as Macrophomina sp. and Lasiodiplodia theobromae. Phylogenetic analysis based on ITS region sequences showed that these two fungi were grouped into the same clade with reference isolates of Macrophomina sp. and L. theobromae from GenBank. Pathogenicity tests were performed, meeting Koch's postulates. The research results confirming the roles of both fungi in causing stem rot on O. ficus-indica, providing essential information for studying reasonable and effective disease prevention and control measures.Xương rồng Nopal (Opuntia ficus-indica) vừa là nguồn thực phẩm giàu dinh dưỡng cho người và gia súc, vừa là giải pháp lý tưởng cho những vùng đất hoang hóa, đất cát nhiễm mặn ven biển bỏ hoang không canh tác nông nghiệp được của Việt Nam, đặc biệt là Ninh Thuận. Những năm gần đây, bệnh thối thân Xương rồng Nopal đã xuất hiện và nhanh chóng lây lan làm đổ gãy cây, ảnh hưởng đến đến năng suất và làm giảm hiệu quả canh tác. Dựa vào đặc điểm hình thái và trình tự DNA vùng ITS, vi nấm gây bệnh được xác định là Macrophomina sp. và Lasiodiplodia theobromae. Phân tích cây phát sinh loài dựa trên trình tự vùng ITS cho thấy 2 vi nấm này phân bố cùng nhóm với các phân lập khác của Macrophomina sp. và L. theobromae trên GenBank. Các thí nghiệm về khả năng gây bệnh đã được thực hiện và đáp ứng định đề của Koch. Kết quả nghiên cứu đã chứng minh vai trò của cả 2 vi nấm trong việc gây bệnh thối thân trên Xương rồng Nopal, cung cấp thông tin quan trọng giúp nghiên cứu các biện pháp phòng trừ hợp lý, hiệu quả.