Xây dựng thang chuẩn DNA để xác định các băng DNA kích thước nhỏ

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thị Thanh Lê, Thị Thương Lan Võ

Ngôn ngữ: Vie

Ký hiệu phân loại:

Thông tin xuất bản: Tạp chí Công nghệ Sinh học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2021

Mô tả vật lý: 539-545

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 404109

Thêm vào giỏ Liên kết toàn văn

Thang chuẩn DNA được sử dụng thường quy trong các phòng thí nghiệm, xét nghiệm về sinh học phân tử. Bên cạnh nguồn thang chuẩn do các hãng thương mại cung cấp, các thang chuẩn được nhiều phòng thí nghiệm chủ động tạo ra (home-made DNA ladders). Trong bài báo này, chúng tôi đưa ra quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất có kích thước 60 bp, hỗ trợ cho các thang chuẩn thương mại 50 bp. Đoạn DNA 60 bp có vị trí nhận biết của EcoRI ở hai đầu 5' và 3' được tổng hợp nhân tạo bằng PCR, tự nối với nhau nhờ T4 DNA ligase và được tách dòng tạo plasmid pSY-60. Cắt không hoàn toàn pSY-60 với enzyme giới hạn EcoRI tạo nên thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất 60 bp, bước nhảy giữa 2 băng là 60 bp. Quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 đơn giản, chi phí thấp, thích hợp cho việc xác định kích thước nhỏ của các đoạn DNA, cDNA khuếch đại bởi phản ứng PCR.

1. Đọc trực tuyến

1. Đọc trực tuyến

Tạo bộ sưu tập với mã QR