Nghiên cứu tạo Enterokinase tái tổ hợp có hoạt tính được biểu hiện trong escherichia coli

 0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thị Huyền Đỗ, Thị Thu Hồng Lê, Kim Phượng Lương, Thị Mai Phương Nguyễn, Thị Thu Hiền Trịnh, Nam Hải Trương

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 576.36 Genetics and evolution

Thông tin xuất bản: Tạp chí Công nghệ Sinh học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 2020

Mô tả vật lý: 553-560

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 430730

Enterokinase là một serine protease thường được ứng dụng ở một số lĩnh vực nghiên cứu công nghệ sinh học. Để sử dụng cho các mục đích đó, chuỗi nhẹ của enterokinase mang hoạt tính xúc tác của enzyme được nghiên cứu để biểu hiện tái tổ hợp vì việc tách chiết enterokinase tự nhiên thường không hiệu quả. Trong nghiên cứu này, chúng tôi trình bày các kết quả nghiên cứu tạo enterokinase chuỗi nhẹ tái tổ hợp có hoạt tính trong Escherichia coli. Protein dung hợp thioredoxin-enterokinase (trx-ent) được biểu hiện trong E. coli chỉ thể hiện hoạt tính bằng khả năng tự phân cắt khi được biểu hiện ở dạng không tan với điều kiện biến tính bằng guanidine và tái gấp cuộn phù hợp. Trong khi đó, enzyme biểu hiện ở dạng tan cũng như là dạng không tan được biến tính bằng urea thì không có hoạt tính. Nồng độ guanidine được sử dụng là 6M cùng với các điều kiện tái gấp cuộn tuần tự là các đệmoxi hóa chứa glutathione oxi hóa, tiếp theo là điều kiện khử sử dụng glutathione khử cùng với chất làm tăng khả năng tan arginine, protein dung hợp Trx-ent sau đó đã có khả năng tự phân cắt. Protein enterokinase chuỗi nhẹ tái tổ hợp có hoạt tính với kích thước khoảng 35 kDa trên điện di biến tính Tris-glycine. Những thử nghiệm ban đầu cho thấy enterokinase có khả năng phân cắt cơ chất trx- sumoprotease thành thioredoxin và sumoprotease. Kết quả này là cơ sở cho nghiên cứu tinh chế enterokinase có hoạt tính để ứng dụng trong công nghệ biểu hiện protein tái tổ hợp.
Tạo bộ sưu tập với mã QR

THƯ VIỆN - TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP.HCM

ĐT: (028) 71010608 | Email: tt.thuvien@hutech.edu.vn

Copyright @2024 THƯ VIỆN HUTECH