Tạo dòng và biểu hiện interleukin-2 người dung hợp với SUMO trên Escherichia coli

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Huỳnh Như Mai, Lê Thanh Huyền Nguyễn, Quốc Thái Nguyễn, Khắc Minh Thái

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 616.9041 Other diseases

Thông tin xuất bản: Tạp chí Y học Việt Nam (Tổng hội Y học Việt Nam), 2023

Mô tả vật lý: 69-73

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 433136

Thêm vào giỏ Liên kết toàn văn

Tóm tắt
Chủ đề

Interleukin-2 (IL-2) đang được quan tâm trong điều trị ung thư và các bệnh tự miễn. Tuy nhiên, ở Việt Nam, nguồn IL-2 dùng cho các thử nghiệm in vitro có giá thành cao. Mục đích tạo được IL-2 người tái tổ hợp dạng dung hợp với tag SUMO trên Escherichia coli. Phương pháp Tạo dòng chủng E. coli BL21(DE3) mang plasmid tái tổ hợp pET-SUMO-il2 có khả năng biểu hiện IL-2 người ở dạng dung hợp với SUMO. Khảo sát các điều kiện nuôi cấy để thu protein dạng tan môi trường (LB, TB, ZYP-5052)
nồng độ IPTG (0,02
0,1
0,5 mM)
nhiệt độ (25 °C và 37 ℃). Tinh chế IL-2 dạng dung hợp bằng sắc ký ái lực cố định ion kim loại (IMAC). Kết quả Chủng E. coli BL21(DE3) mang plasmid tái tổ hợp pET-SUMO-il2 có khả năng tạo IL-2 dạng dung hợp với hiệu suất cao trong môi trường TB cảm ứng với IPTG 0,1 mM ở 25 ℃. Từ 200 mL dịch nuôi cấy tinh chế thu được khoảng 108 mg protein. Kết luận Nghiên cứu đã tạo dòng thành công chủng E. coli BL21(DE3) mang plasmid tái tổ hợp pET-SUMO-il2 có khả năng tạo IL-2 tan ở dạng dung hợp với tag SUMO với hiệu suất cao và được tinh chế thành công qua cột Ni Sepharose.

Tạo bộ sưu tập với mã QR