Tách dòng, biểu hiện, và khảo sát đặc tính enzyme laccase từ nấm mục trắng Pleurotus pulmonarius MPN18

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thu Quỳnh Đặng, Hữu Nghị Đỗ, Việt Hoàng Lê, Huy Hoàng Nguyễn, Ngọc Lan Nguyễn

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 576 Genetics and evolution

Thông tin xuất bản: VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, 2023

Mô tả vật lý: 59-67

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 445841

Thêm vào giỏ Liên kết toàn văn

Tóm tắt
Chủ đề

Laccase (EC 1.10.3.2) là enzyme thuộc họ oxidase, có vai trò quan trọng trong quá trình oxy hóa nhiều loại cơ chất chứa vòng thơm, đặc biệt là lignin, phenol, polyamin, và các aryl diamin cũng như một số các ion vô cơ khi có mặt của oxy. Laccase được ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực khác nhau, đặc biệt trong ngành công nghiệp dệt, nhuộm, và xử lý ô nhiễm môi trường. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tách dòng và biểu hiện thành công cDNA của gene laccase từ nấm mục trắng Pleurotus pulmonarius MPN18 (PpLac). cDNA của gene laccase (có kích thước 1566 bp) được gắn vào vector pET 21a (+) và biểu hiện trong E. coli BL21, sau đó enzyme được tinh sạch qua cột HisTrapTM sp 5mL. PpLac tinh sạch có hoạt độ 899,8 U, hiệu suất 74% với độ tinh sạch 15,2 lần, và được kiểm tra bằng điện di SDS-PAGE có trọng lượng phân tử Mw = 55 kDa. Enzyme hoạt động tối ưu ở 50 ºC và pH 4.0. Enzyme giữ hoạt tính ở 20-40 ºC sau 120 phút ủ và pH 4 sau 6 h ủ. Enzyme sẽ được tiếp tục đánh giá tính chất để xem xét khả năng bổ sung hỗn hợp enzyme cho chuyển hóa hiệu quả trong xử lý phụ phẩm nông-lâm nghiệp giàu lignocellulose.

Tạo bộ sưu tập với mã QR