Ba hợp chất kirenol (1), darutosid (2) và darutigenol (3) là những diterpenoid chính trong dược liệu hy thiêm, có tác dụng giảm đau, chống viêm. Chuyên luận hy thiêm trong Dược điển Việt Nam V hiện nay chưa có yêu cầu về chỉ tiêu định lượng hoạt chất. Trong nghiên cứu này, đã xây dựng một phương pháp HPLC có độ lặp lại, độ thu hồi tốt cho định lượng đồng thời hợp chất 1, 2 và 3 trong dược liệu hy thiêm. Phương pháp định lượng được áp dụng thành công để xác định hàm lượng các chất 1-3 trong các mẫu hy thiêm thu hái tại các điểm khác nhau. Kết quả cho thấy hàm lượng của hợp chất 1 khoảng từ 0 - 5,77 mg/g, hợp chất 2 dao động từ 0,82 - 5,48 mg/g và hợp chất 3 dao động từ 0,37 - 3,18 mg/g. Những kết quả thu được gợi ý làm cơ sở tham khảo cho việc nâng cấp tiêu chuẩn và kiểm tra chất lượng dược liệu hy thiêm.