Biểu hiện của một sàng lọc gen serpin mới từ cơ sở dữ liệu metagenomics ở Pichia pastoris và một số đặc điểm của protein tái tổ hợp

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Viet Cuong Pham, Thi Hong Tran

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại:

Thông tin xuất bản: Tạp chí Sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, 2021

Mô tả vật lý: 73-82

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 450131

Thêm vào giỏ Liên kết toàn văn

Tóm tắt
Chủ đề

Hiện nay, việc tìm kiếm các chất ức chế protease mới đang được nhiều nhà khoa học trên thế giới quan tâm vì chúng đóng vai trò quan trọng trong việc kiểm soát các protease có hại. Khi các nguồn hoạt tính sinh học trên cạn ngày càng cạn kiệt, các nghiên cứu nhằm tìm kiếm các nguồn khác, ví dụ như đại dương. Một số báo cáo gần đây chỉ ra rằng vi sinh vật có liên quan đến bọt biển tạo ra các chất có hoạt tính sinh học cao, chẳng hạn như chống ung thư và chống viêm, ức chế protease, v.v. Trong báo cáo này, một gen serpin mới được sàng lọc từ cơ sở dữ liệu đo lường của vi sinh vật Spheciospongia vesparium QT2 được thu thập biển tỉnh Quảng Trị (Việt Nam), được thể hiện thành công trong Pichia pastoris SMD1168. Kết quả thu được cho thấy lượng protein tái tổ hợp tối đa tiết ra trong môi trường nhận được sau 72 giờ cảm ứng với metanol. Điện di PAGE bổ sung 0,1% casein và cột sắc ký ái lực Trypsin-sepharose 4B đã được thực hiện, và kết quả được xác nhận rằng protein tái tổ hợp biểu hiện trong P. pastoris SMD1168 (trọng lượng phân tử khoảng 50 kDa) là protein đích. Protein tái tổ hợp PI-QT tinh khiết thể hiện hoạt tính ức chế đối với trypsin, ɑ-chymotrypsin và thermolysin và mức độ ức chế tương ứng là 88,7%, 69% và 43%. Ngoài ra, protein PI-QT ổn định và có hoạt tính tối ưu trong khoảng pH 7-9, nhiệt độ dưới 60 oC.

Tạo bộ sưu tập với mã QR