Bước đầu khảo sát tính chuyên biệt của quy trình Real-time PCR phát hiện Helicobacter pylori được phân lập từ mẫu sinh thiết dạ dày

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thế Trung Bùi, Thị Thanh Thùy Lê, Thùy An Nguyễn, Tiến Dũng Nguyễn

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại:

Thông tin xuất bản: Tạp chí Y học Việt Nam (Tổng hội Y học Việt Nam), 2023

Mô tả vật lý: 247-252

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 450731

Thêm vào giỏ Liên kết toàn văn

Xây dựng và đánh giá chỉ số kỹ thuật của quy trình real-time PCR phát hiện vi khuẩn Helicobacter pylori được phân lập từ mẫu bệnh phẩm dựa trên trình tự gen 23S rRNA với cặp mồi CRF-4 và CRR-1(6). Phương pháp: Độ đặc hiệu của quy trình real-time PCR phát hiện vi khuẩn H. pylori với cặp mồi đã xây dựng được đánh giá với: (1) 25 chủng vi khuẩnkhác với H. pylori, vi nấm thường được phát hiện trong các mẫu bệnh phẩm trên đường nội soi lấy mẫu sinh thiết dạ dày
và (2) 150 chủng phân lập được từ mẫu hang vị dạ dày bệnh nhân nhi, trong đó có những chủng được xác định là H. pylori và một số chủng nghi ngờ. Độ chuyên biệt đoạn gen mục tiêu trên 23S rRNA của H. pylori cũng được khẳng định thông qua việc giải trình tự sản phẩm khuếch đại kích thước 135 bp trên 9 chủng có đặc điểm khác biệt về hình thái nhuộm soi, đặc điểm khuẩn lạc, tính chất của các thử nghiệm sinh hóa định danh. Kết quả: Quy trình real-time PCR với cặp mồi CRF-4 và CRR-1 đặc hiệu cho H. pylori được khẳng định là đặc hiệu khi thử nghiệm cho kết quả âm tính với các vi sinh vật không phải H. pylori phân lập từ mẫu sinh thiết trong quá trình nội soi dạ dày
và dương tính với 150 chủng H. pylori được phân lập từ mẫu hang vị dạ dày bệnh nhân nhi bằng phương pháp nuôi cấy. Độ đặc hiệu của các sản phẩm PCR đã được đánh giá dựa theo kết quả so sánh tương đồng trình tự khuếch đại với 10 chủngHelicobacter spp., kết quả so sánh cho thấy trình tự gen mục tiêu được khuếch đại có sự tương đồng 97,78% đến 99,26% so với trình tự tương ứng của H. pylori đã được công bố trên ngân hàng gen GenBank. Kết luận: Quy trình real-time PCR dựa trên gen 23S rRNA với cặp mồi CRF-4 và CRR-1 dùng để phát hiện vi khuẩn H. pylori đã được xây dựng thành công với độ đặc hiệu là 100%.

1. Đọc trực tuyến

1. Đọc trực tuyến

Tạo bộ sưu tập với mã QR