Dược liệu Hy thiêm là phần trên mặt đất của cây Hy thiêm, được sử dụng làm thuốc điều trị đau lưng, gối, xương khớp, chân tay tê buốt. Trong Hy thiêm chứa nhiều phenolic như acid chlorogenic (1), acid caffeic (2) và rutin (3) và chúng được lựa chọn làm chất marker để xây dựng phương pháp định lượng. Trong nghiên cứu này, phương phương pháp định lượng đồng thời 1-3 bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với đầu dò DAD được xây dựng. Cột sắc ký sử dụng tách các chất là Agilent C18 (250 x 4,6 mm
5 μm) được duy trì ở nhiệt độ 25 ± 0,1 oC. Pha động gồm MeCN - acid phosphoric 0,1% trong nước, được rửa giải theo chế độ gradient. Tốc độ dòng là 1,0 ml/phút. Bước sóng phát hiện là 320 nm đối với chất 1 và 2, 360 nm đối với chất 3. Thể tích tiêm là 20 μl. Phương pháp được thẩm định và đạt các yêu cầu theo hướng dẫn của ICH, AOAC về tính tương thích hệ thống, độ đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ chính xác và độ đúng. Áp dụng phương pháp định lượng đã xây dựng, xác định được hàm lượng các chất 1, 2, 3 trong các mẫu Hy thiêm lần lượt là 0,09-0,82 mg
0,02-0,21 mg/g và 0,07-0,52 mg/g. Phương pháp định lượng này có thể góp phần đánh giá chất lượng dược liệu Hy thiêm và các sản phẩm liên quan.