Sự ô nhiễm nước thải bệnh viện ngày càng tăng do nhu cầu sử dụng kháng sinh trong phòng và chữa bệnh ngày càng tăng cao. Việc nghiên cứu xác định hàm lượng kháng sinh trong nước thải bệnh viện chưa được chú trọng nghiên cứu. Mục tiêu nghiên cứu của chúng tôi là xác định đồng thời 6 kháng sinh Amoxicillin, Levofloxacin, Ciprofloxacin, Cephalexin, Moxifloxacin, Clarithromycin trong nước thải bằng phương pháp sắc ký lỏng 2 lần khối phổ (LC/MS/MS). Đồng thời tiến hành nghiên cứu thực tiễn trên các mẫu nước thải bệnh viện thu được. Kết quả cho thu được cho thấy: đã tìm ra phương pháp xác định đồng thời 6 chất kháng sinh trong nước thải bằng phương pháp sắc ký lỏng 2 lần khối phổ (LC/MS/MS) sử dụng cột chiết pha rắn Oasis HLB (500mg/6ml). Giới hạn pháp hiện của phương pháp đối Amoxicillin, Levofloxacin, Ciprofloxacin, Cephalexin, Moxifloxacin, Clarithromycin lần lượt là 0.4, 0.05, 0.28, 0.74, 1.04, 0.06 μ/L, độ lệch chuẩn nhỏ hơn 8%, hiệu suất thu hồi từ 82,4-101,3%. Nghiên cứu có độ lặp lại và độ tin cậy cao, có thể ứng dụng rộng rãi trong việc xác định các chất kháng sinh trong nước. Tiến hành áp dụng phương pháp nghiên cứu trên các mẫu nước thải thực tế của các bệnh viện kết quả đã xác định được các chất kháng sinh trong nước thải bệnh viện.