Nghiên cứu này phát triển phương pháp HPLC-PDA với mục đích xác định hai thuốc nhuộm Auramine O và Rhodamine B trong các mẫu thực phẩm. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của Auramine O (AO) và Rhodamine B (RB) cùng có giá trị lần lượt là 0,02 mg/L và 0,05 mg/L. Hệ số thu hồi của AO và RB trong nền mẫu thực phẩm có giá trị trong khoảng 83,00% đến 105,91% ở các nồng độ chất phân tích 0,5 μg/g, 1,0 μg/g và 1,5 μg/g. Phương pháp phân tích được thực hiện đơn giản, có kết quả chính xác và phù hợp để định lượng các thuốc nhuộm này trong thực phẩm.