Thu nhận hiệu quả beta-mannanase dung hợp với móc neo LysM3014 trong Escherichia coli bằng phương pháp phá vỡ tế bào với hạt thủy tinh=Efficient recovery of beta-mannanase fused with LysM3014 domain in Escherichia coli by glass bead based-cell disruption method

 0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Hoàng Minh Nguyễn

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại:

Thông tin xuất bản: Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 2025

Mô tả vật lý: tr.45850

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 478455

Hướng đến sự phát triển hệ thống xúc tác toàn tế bào theo phương thức không biến đổi gen, trong nghiên cứu này, ba phương pháp phá vỡ tế bào E. coli gồm: siêu âm, kết đông - rã đông và lắc với hạt thủy tinh được thực hiện để thu nhận hiệu quả enzyme lai LysM3014-ManB chứa beta-mannanase (ManB) từ Bacillus licheniformis dung hợp với một vùng LysM từ transglycosylase ngoại bào giả định Lp_3014 của Lactobacillus plantarum WCFS1. Kết quả cho thấy, hoạt tính xúc tác của beta-mannanase cao nhất (~46.651 U/l dịch lên men) đạt được khi tế bào được phá vỡ bởi hạt thủy tinh. Ngoài ra, hoạt tính xúc tác của đoạn enzyme lai đã tăng lên 1,4 lần (~66.000 U/l dịch lên men) trong điều kiện phá vỡ tế bào bằng hạt thủy tinh sử dụng ống falcon có thể tích 50 ml với tỷ lệ hạt thủy tinh 1,0 g/ml và thời gian phá vỡ là 8 phút. Nghiên cứu này cho thấy, phá vỡ tế bào bằng hạt thủy tinh là phương pháp đơn giản và hiệu quả nhất so với các phương pháp còn lại. Enzyme lai có thể được sử dụng để tiếp tục nghiên cứu quá trình cố định ManB trên bề mặt tế bào L. plantarum thông qua móc neo chứa một vùng LysM.Toward the development of whole cell biocatalysts via non-GMO strategy, in this study, three E. coli cell disruptions, including sonication, freezing - thawing, and bead-shaking have been evaluated to recover efficiently fusion protein LysM3014-ManB containing a beta-mannanase (ManB) from Bacillus licheniformis fused with a single LysM3014 domain derived from a putative extracellular transglycosylase Lp_3014 of Lactobacillus plantarum WCFS1. The results showed that the highest volumetric activity of beta-mannanase (~46,651 U/l fermentation) was obtained when shaking the cells with glass beads. Moreover, the hybrid enzymatic activity of LysM3014-ManB increased approximately 1.4 folds (~66,000 U/l fermentation) under the optimum conditions of glass bead-based cell disruption with falcon 50 ml, glass bead ratio of 1.0 g/ml and disruption time of 8 min. The study indicates that shaking the cells with glass beads is likely to be the simplest and the most efficient cell disruption method in comparison with other disruption methods. Hybrid enzymes can be used to further study the immobilisation of ManB on the surface of L. plantarum through an anchor containing a LysM domain.
Tạo bộ sưu tập với mã QR

THƯ VIỆN - TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP.HCM

ĐT: (028) 36225755 | Email: tt.thuvien@hutech.edu.vn

Copyright @2024 THƯ VIỆN HUTECH