Theanin là một loại acid amin tự nhiên, có nhiều trong chè xanh và được bổ sung vào các sản phẩm đồ uống chứa chè xanh, thực phẩm bảo vệ sức khỏe chứa chiết xuất chè xanh. Trong nghiên cứu này, phương pháp phân tích theanin bằng HPLC với dẫn xuất o-phtalaldehyd (OPA) đã được xây dựng và thẩm định. Theanin được chiết khỏi nền mẫu bằng nước và tạo dẫn xuất với thuốc thử OPA, sau đó tách sắc ký trên cột Xbridge C18 (250 mm × 4,6 mm
5 µm), pha động gồm dung môi amoni acetat 20 mM và methanol theo chương trình gradient, detector huỳnh quang với bước sóng kích thích 345 nm, bước sóng phát xạ 455 nm. Phương pháp có độ đặc hiệu tốt, độ thu hồi và độ chụm đạt yêu cầu của AOAC. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng lần lượt là 3,0 µg/g và 10,0 µg/g. Phương pháp đã được ứng dụng để phân tích hàm lượng theanin trong nền mẫu chè, các đồ uống và thực phẩm bảo vệ sức khỏe chứa chiết xuất chè xanh tại Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia.Theanine is a natural amino acid abundant in green tea and is added to green tea-based beverages and health supplements containing green tea extract. In this study, a method for analyzing theanine using HPLC with o-phthalaldehyde (OPA) derivatization has been developed and validated. Theanine was extracted from the sample using water and then derivatized with OPA reagent, then chromatographically separated on a Xbridge C18 column (250 mm × 4.6 mm
5 µm), with a mobile phase consisting of 20 mM ammonium acetate and methanol in a gradient program. Fluorescence detector was used with an excitation wavelength of 345 nm and an emission wavelength of 455 nm. The method demonstrated good specificity, recovery and accuracy required by AOAC. The limits of detection and quantification were 3.0 µg/g and 10.0 µg/g, respectively. This method has been applied to analyze the theanine content in tea samples, beverages, and health supplements containing green tea extract at the National Institute for Food Control.