Bệnh viêm ruột hoại tử là một trong những bệnh đường ruột nguy hiểm trên gia cầm, gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi. Các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng độc tố NetB của vi khuẩn C. perfringens là tác nhân chính gây ra các bệnh tích điển hình của bệnh viêm ruột hoại tử ở gà. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã thu thập 300 mẫu phân gà và 300 mẫu ruột gà nghi mắc bệnh viêm ruột hoại tử tại các tỉnh: Thái Bình, Nam Định, Bình Định, Khánh Hòa, Cần Thơ, Tiền Giang để phân lập vi khuẩn C. perfringens. Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ mẫu phân gà nhiễm C. perfringens là 101/300 (33,67%) và tỷ lệ mẫu ruột gà nhiễm C.perfringens là 171/300 (57%). Kết quả xác định type độc tố bằng phản ứng multiplex-PCR cho thấy 272/272 (100%) chủng C. perfringens phân lập được đều thuộc type A. Kết quả xác định gen độc lực netB bằng phản ứng PCR từ các chủng phân lập được cho thấy có 69/272 (25,37%) chủng mang gen netB.Necrotic enteritis is one of the most important enteric diseases in poultry and causes high economic loss to the livestock industry. The recent studies have shown that NetB toxin of C. perfringens is a critical virulence factor in the pathogenesis of necrotic enteritis in chickens. In this study, we collected 300 fecal and 300 intestinal samples from the necrotic enteritis suspected chickens in the provinces: Thai Binh, Nam Dinh, Binh Dinh, Khanh Hoa, Can Tho, and Tien Giang to isolate C. perfringens. The studied result showed that 101/300 (33,67%) of fecal samples and 171/300 (57%) of intestinal samples contaminated with C. perfringens, respectively. The results of determining the toxin type by multiplex-PCR indicated that 272/272 (100%) of C. perfringens isolates belonged to type A. The PCR for detection of netB gene showed that 69/272 (25.37%) of C. perfringens isolates harbored netB gene.