A method based on ultra-high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (UPLC/MS/MS) was developed for simple and rapid determination of the residues of Auramine O in animal feedstuffs. The samples were extracted by MeOH: H2O + HCOOH 0.1% and then analyzed in multiple reaction monitoring (MRM) mode. The mobile phase was ultrapure water with 0.1% formic acid. Under the optimized detection conditions, the linear range for Auramine O was 20 - 100µg/L and the linear correlation coefficients found more than 0.99. The limit of quantification of Auramine O was 0.34 mg/kg. The recoveries of Auramine O ranged from 64.71 - 94.12% with relative standard deviations (RSD) of 4.93 - 8.31% with the concentration range of 20 - 100 µg/L. This method is simple, effective, sensitive and is suitable for the determination and confirmation of Auramine O in animal feedstuffsTrong nghiên cứu này, qui trình phân tích sử dụng thiết bị sắc kí lỏng siêu hiệu năng khối phổ hai lần (UPLC/MS/MS) được phát triển và áp dụng nhằm xác định hàm lượng Auramine O trong thức ăn chăn nuôi. Mẫu được chiết bằng hỗn hợp dung dịch MeOH:H2O (9:1) + HCOOH 0,1%, và định lượng trên UPLC/MS/MS. Pha động sử dụng nước siêu tinh khiết với 0,1% axit formic. Ở điều kiện tối ưu, khoảng tuyến tính của Auramine O từ 20 đến 100µg/L và hệ số tương quan tuyến tính đạt trên 0,99. Giới hạn định lượng Auramine O là 0,34mg/kg. Trong khoảng nồng độ nghiên cứu (20 - 100µg/L), tỉ lệ thu hồi của Auramine O trong khoảng 64,71 - 94,12% với độ lệch chuẩn (RSD) là 4,93 - 8,31%. Phương pháp đạt độ nhạy và độ chọn lọc cao, qui trình chiết mẫu đơn giản, thời gian phân tích nhanh, phù hợp trong phân tích hàm lượng Auramine O trong thức ăn chăn nuôi và các mẫu thực phẩm khác.