Cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB của Escherichia coli trong té bào khả biến Escherichia coli BL21 (DE3)

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thanh Long Đặng, Thị Hương Đặng, Thị Bích Lân Đinh, Văn Chương Huỳnh, Công Thịnh Lê, Đức Thạo Lê, Quốc Việt Lê, Viết Quân Lê, Thị Bình Nguyễn, Thăng Long Phùng

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 589.95 [Unassigned]

Thông tin xuất bản: Khoa học Kỹ thuật Thú y, 2018

Mô tả vật lý: 57-63

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 492241

Thêm vào giỏ

Nghiên cứu này nhằm cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB trong tế bào E. coli chủng BL21 (DE3) mang gen eltB của vi khuẩn E. coli. Kết quả nghiên cứu cho thấy môi trường nuôi cấy TB và YJ cho khả năng sinh trưởng tốt nhất của vi khuẩn E. coli với tỷ lệ tiếp giống là 2% (OD600 = 0,8), lắc 200 vòng/phút ở nhiệt độ 37ºC sau 9 giờ nuôi cấy. Mức độ biểu hiện của protein dung hợp 6xHis-LTB cho kết quả tốt nhất trên môi trường YJ và HSG trong cùng điều kiện tối ưu (nồng độ chất cảm ứng Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) 1,2 mM, lắc 200 vòng/phút, nhiệt độ cảm ứng 25ºC - 35ºC trong thời gian 8 giờ). Sắc ký lọc gel 6xHis cho sản phẩm protein dung hợp 6xHis-LTB có khối lượng phân tử khoảng 35 kDa.The study on improvement of the recombinant protein LTB expression level in E. coli strain BL21 (DE3) encoding gene eltB of E. coli was conducted. The studied results showed that TB and YJ media have given the best growth of E. coli BL21 (DE3) in comparison with other media in the same 2 % initial seed inoculum size (OD600 = 0.8), shaking 200 rpm at 370C for 9 hours. The highest level of fusion protein (6xHis-LTB) was obtained from YJ and HSG media in the same optimum culture condition (1.2 mM Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) for 8 hours at 250C-350C). Molecular weight of purified 6xHis-LTB protein from 6xHis affinity chromatography was about 35 kDa.

1. Đọc trực tuyến

1. Đọc trực tuyến

Tạo bộ sưu tập với mã QR