Phát hiện nhanh streptococcus agalactiae và streptococcus iniae từ mẫu mô cá bằng kỹ thuật duplex pcr

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Mộng Huyền Hồng, Trang Huyền Nguyễn, Thị Tuyết Hoa Trần

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 571.9617 Diseases Pathology

Thông tin xuất bản: Khoa học (Đại học Cần Thơ), 2016

Mô tả vật lý: 111-117

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 525699

Thêm vào giỏ

Nghiên cứu thực hiện nhằm phát triển quy trình duplex PCR phát hiện đồng thời hai loại vi khuẩn S. agalactiae và S. iniae gây Streptococcosis trên cả nước ngọt và mặn. Quy trình khếch đại sản phẩm dựa trên các gen lactae oxidase (lctO) và 16 s rRNA của S. iniae và S. agalactiae tương ứng tại 870 bp và 220 bp. Nghiên cứu xác định được: (i) thành phần hóa chất phản ứng bao gồm: 1 X PCR buffer
2 mMMgCl2
250 microM dNTPs
10 pm mòi F1
10 pm mồi IMOD
5 pm mồi LOX-1
5 pm mồi LOX-2
1,0 U Taq polymerase
1 microL DNA S. agalactiae chiết tách
1 microL DNA S. iniae chiết tách, tổng thể tích phản ứng là 25 microL và (ii) chu kỳ nhiệt cho phản ứng duplex PCR: 95 độ C trong 5 phút, tiếp theo 35 chu kỳ: 95 độ C trong 1 phút, 57 độ C trong 1 phút, 72 độ C trong 1 phút và cuối cùng 72 độ C trong 7 phút. Độ nhạy của quy trình được xác định đối với S. agalactiae là 10 mũ 0 cfu/mL và S. iniae là 10 mũ 3 cfu/mL. quy trình duplex PCR không khuếch đại sản phẩm đặc hiệu khi kiểm tra với Edwardsiella ictaluri, Aeromanas hydrophila, Vibrio harveyi và Vibrio parahaemolyticus.

1. Đọc trực tuyến

1. Đọc trực tuyến

Tạo bộ sưu tập với mã QR