Tối ưu hóa phương pháp HRM cho việc chẩn đoán bệnh thiếu men G6PD ở dân tộc Kinh thông qua đột biến Viangchan

0 Người đánh giá. Xếp hạng trung bình 0

Tác giả: Thị Lan Anh Đặng, Diên Thanh Giang Nguyễn, Thị Cẩm Hương Nguyễn, Thị Huệ Nguyễn

Ngôn ngữ: vie

Ký hiệu phân loại: 616.97042 Other diseases

Thông tin xuất bản: Công nghệ sinh học, 2016

Mô tả vật lý: 589-598

Bộ sưu tập: Metadata

ID: 537803

Thêm vào giỏ

Tóm tắt
Chủ đề

A total of 56 dried blood samples, including 6 control samples and 50 unknown genotypes were collected and extracted DNA using the QIAamp DNA Blood Mini Kit. HRM primer pairs are designed with Umelt software. Then the optimized HRM reaction with a concentration of 2.5 micromol MgCl2 and a primer temperature of 62 degrees C was applied to 50 samples and compared to the results from the ARMS-PCR method for real show evaluation step. The results showed that the sensitivity and specificity of HRM all reached 100%. Thereby, the study has been successful in optimizing the conditions of HRM and is an essential condition for applying this method to other mutations causing G6PD disease, as well as continuing to develop the reaction. Multiplex HRM to diagnose diseases.Tổng số 56 mẫu máu khô, trong đó có 6 mẫu đối chứng và 50 mẫu chưa biết kiểu gen được thu thập và trích DNA bằng bộ Kit QIAamp DNA Blood Mini. Các cặp mồi dùng trong phân tích HRM được thiết kế bằng phần mềm Umelt. Sau đó phản ứng HRM được tối ưu hóa với nồng độ MgCl2 là 2,5 micromol và nhiệt độ bắt cặp của mồi là 62 độ C được áp dụng cho 50 mẫu và được só sánh với kết quả từ phương pháp ARMS-PCR để thực hiện bước đánh giá. Kết quả cho thấy độ nhạy và độ đặc hiệu của HRM đều đạt mức 100%. Qua đó cho thấy nghiên cứu đã thành công trong việc tối ưu hóa các điều kiện của HRM và là điều kiện thiết yếu cho việc áp dụng phương pháp này cho các loại đột biến gây bệnh G6PD khác, cũng như tiếp tục phát triển phản ứng Multiplex HRM để chẩn đoán bệnh.

Tạo bộ sưu tập với mã QR